medsovetМедицинский СоветMeditsinskiy sovet = Medical Council2079-701X2658-5790REMEDIUM GROUP Ltd.10.21518/2079-701X-2020-16-56-61medsovet-5845Research ArticleАКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ОТОРИНОЛАРИНГОЛОГИИTOPICAL ISSUES OF OTORHINOLARYNGOLOGYГистологическая оценка влияния плазмы крови, обогащенной тромбоцитарными факторами роста, на барабанную перепонкуHistological evaluation of effect of PDGF-rich plasma on the tympanic membranehttps://orcid.org/0000-0001-8483-2530КрюковА. И.KriukovA. I.

Крюков Андрей Иванович, член-корреспондент РАН, доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ, директор, Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Научно-исследовательский клинический институт оториноларингологии имени Л.И. Свержевского» Департамента здравоохранения города Москвы; заведующий кафедрой оториноларингологии лечебного факультета, Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения Российской Федерации

117997, Москва, ул. Островитянова, д. 1, 

117152, Москва, Загородное шоссе, д. 18а, стр. 2

Andrey I. Kriukov, Dr. of Sci. (Med.), Professor, Honoured Worker of Science of RF, Director, State Budgetary Healthcare Institution “Sverzhevsky Scientific and Research Otolaryngology Clinical Institute” Department of Health Care of the City of Moscow; Head of the Department of Otorhinolaryngology, Faculty of Medicine, Federal State Autonomous Educational Institution of Higher Education “Pirogov Russian National Research Medical University” of the Ministry of Health of the Russian Federation

1, Ostrovityanov St., Moscow, 117997, 

18a, Bldg. 2, Zagorodnoe Shosse, Moscow, 117152

https://orcid.org/0000-0001-9811-8397ГуровА. В.GurovA. V.

Гуров Александр Владимирович, доктор медицинских наук, профессор, профессор кафедры оториноларингологии лечебного факультета

117997, Москва, ул. Островитянова, д. 1

Alexander V. Gurov, Dr. of Sci. (Med.), Professor, Professor of Department of Otorhinolaryngology, Faculty of General Medicine

1, Ostrovityanov St., Moscow, 117997

alex9999@inbox.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0232-0545БахтинА. А.BakhtinA. A.

Бахтин Артур Александрович, кандидат медицинских наук, руководитель отдела, заведующий отделением патологической анатомии

123182, Москва, Волоколамское шоссе, д. 30, корп. 2

Arthyr A. Bakhtin, Cand. of Sci. (Med.), Head of Division, Head of Department of Pathological Anatomy

30, Bldg. 2, Volokolamskoe Shosse, Moscow, 123182

otolar@fmbamail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7412-6448МурзахановаЗ. В.MurzakhanovaZ. V.

Мурзаханова Зульфия Ваизовна, аспирант кафедры оториноларингологии лечебного факультета

117997, Москва, ул. Островитянова, д. 1

Zulfiya V. Murzakhanova, postgraduate student, Department of Otorhinolaryngology, Faculty of General Medicine

1, Ostrovityanov St., Moscow, 117997

z-u-l-4-i-k@mail.ruРоссийский национальный исследовательский университет им. Н.И. Пирогова; Научный исследовательский клинический институт оториноларингологии им. Л.И. СвержевскогоРоссияPirogov Russian National Research Medical University; Sverzhevsky Scientific and Research Otolaryngology Clinical InstituteRussian FederationРоссийский национальный исследовательский университет им. Н.И. ПироговаРоссияPirogov Russian National Research Medical UniversityRussian FederationНаучный медицинский исследовательский центр оториноларингологииРоссияScientific and Clinical Center of Otorhinolaryngology of the Federal Medico-Biological AgencyRussian Federation2020131120200165661Copyright © Крюков А.И., Гуров А.В., Бахтин А.А., Мурзаханова З.В., 20202020Крюков А.И., Гуров А.В., Бахтин А.А., Мурзаханова З.В.Kriukov A.I., Gurov A.V., Bakhtin A.A., Murzakhanova Z.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.med-sovet.pro/jour/article/view/5845Введение

Введение. Перспективным методом лечения острой посттравматической перфорации барабанной перепонки является применение плазмы крови, обогащенной тромбоцитарными факторами роста (ПКОТФР).

Цель исследования

Цель исследования. Изучить микроскопическую картину тканей перфорированной барабанной перепонки после введения в область перфорации барабанной перепонки плазмы крови, обогащенной тромбоцитарными факторами роста в эксперименте.

Материалы и методы

Материалы и методы. Обследовали 36 крыс (72 барабанные перепонки). Животных поделили на 2 группы – основную и контрольную. При помощи стерильной игры произвели перфорацию барабанной перепонки крысам обеих групп. Животным основной группы ввели однократно аппликационно аутоплазму крови, обогащенную тромбоцитарными факторами роста, в область перфорации барабанной перепонки. Животным контрольной группы произвели лишь динамическое наблюдение. Крыс вывели из эксперимента партиями по 6 особей на 5-, 10-, 15-е сут. после перфорации барабанной перепонки, затем произвели гистологическую оценку регенерации тканей барабанных перепонок.

Результаты

Результаты. У животных основной группы на 5-е сут. достоверно реже регистрировали отек, дезорганизацию соединительной ткани, чем у животных контрольной группы (р ≤ 0,05). Фибробластную инфильтрацию тканей барабанной перепонки достоверно чаще отмечали у крыс основной группы по сравнению с крысами контрольной группы (р ≤ 0,05). У крыс основной группы на 10-е сут. отек и дезорганизацию соединительной ткани барабанных перепонок отмечали достоверно реже, чем у крыс контрольной группы (р ≤ 0,05). Признаки фибробластной инфильтрации и неоангиогенеза в те же сроки у животных основной группы выявили достоверно чаще в отличие от крыс контрольной группы (р ≤ 0,05). У животных основной группы на 15-е сут. фибробластную инфильтрацию и неоангиогенез выявили во всех случаях наблюдения, что достоверно превышало соответствующие показатели в контрольной группе, а лейкоцитарную инфильтрацию у крыс основной группы, в отличие от предыдущих этапов исследования, отмечали достоверно реже, чем у крыс контрольной группы (р ≤ 0,05).

Заключение

Заключение. Более раннюю и полную регенерацию поврежденных тканей барабанной перепонки в условиях ее травматической перфорации отметили у крыс основной группы под влиянием ПКОТФР. У крыс основной группы визуализировали более организованные коллагеновые волокна, наличие базофильных лейкоцитов, признаки неоангиогенеза и обширные поля фибробластов.

Introduction

Introduction. Тo study the microscopic picture of the tissues of the perforated tympanic membrane after the introduction of blood plasma enriched with platelet growth factors into the perforated area of the tympanic membrane in the experiment.

Materials and methods

Materials and methods. 36 rats (72 tympanic membranes) were examined. The animals were divided into 2 groups, the main and the control. The tympanic membrane was perforated in rats of both groups using sterile play. Animals of the main group were injected with a single application of autoplasm of blood enriched with platelet growth factors into the area of perforation of the tympanic membrane. The animals of the control group underwent only dynamic observation. The rats were withdrawn from the experiment in batches of 6 individuals on day 5, 10, 15 after the tympanic membrane perforation, then a histological assessment of the tissue regeneration of the tympanic membranes was performed. Results. In animals of the main group on the 5th day after perforation of the tympanic membrane, edema and disorganization of connective tissue were significantly less frequently recorded than in animals of the control group (p ≤ 0.05). Fibroblastic infiltration of tympanic membrane tissues was significantly more often observed in rats of the main group compared with rats in the control group (p ≤ 0.05). In rats of the main group on the 10th day after perforation of the tympanic membrane, edema and disorganization of the connective tissue of the tympanic membranes were noted significantly less frequently than in rats of the control group (p ≤ 0.05). Signs of fibroblastic infiltration and neoangiogenesis at the same time in animals of the main group were revealed significantly more often, in contrast to rats in the control group (p ≤ 0.05). In animals of the main group, on the 15th day after perforation of the tympanic membrane, fibroblastic infiltration and neoangiogenesis were revealed in all cases of observation, which significantly exceeded the corresponding indicators in the control group, and leukocyte infiltration in rats of the main group, in contrast to the previous stages of the study, was noted significantly less frequently. than in rats of the control group (p ≤ 0.05).

Conclusion

Conclusion. Earlier and complete regeneration of damaged tissues of the tympanic membrane under conditions of its traumatic perforation was noted in rats of the main group under the influence of PCOTFR. In rats of the main group, more organized collagen fibers, the presence of basophilic leukocytes, signs of neoangiogenesis, and extensive fields of fibroblasts were visualized.

барабанная перепонкатравматическая перфорацияплазма кровитромбоцитарные факторы ростарегенерациякрысыtympanic membranetraumatic perforationblood plasmaplatelet growth factorsregenerationratsReferencesГаров Е.В., Крюков А.И., Зеленкова В.Н., Сидорина Н.Г., Калошина А.С. Атипичное течение воспаления в среднем ухе. Вестник оториноларингологии. 2017;82(4):9–15. doi: 10.17116/otorino20178249-15.Garov E.V., Kryukov A.I., Zelenkova V.N., Sidorina N.G., Kaloshina A.S. Аtypical inflammation of the middle ear. Vestnik otorinolaringologii = Bulletin of Otorhinolaryngology. 2017:82(4):9–15. (In Russ.) doi: 10.17116/otorino20178249-15.Гуров, А.В., Ельчанинов А.В., Мурзаханова З.В. Применение плазмы крови, обогащенной тромбоцитарными факторами роста, при экспериментальной перфорации барабанной перепонки. Медицинский совет. 2019;(20):108–114. doi: 10.21518/2079-701X-2019-20-108-114.Gurov A.V., El’chaninov A.V., Murzakhanova Z.V. Application of blood plasma enriched with platelet derived growth factors in experimental perforation of the tympanic membrane. Meditsinskiy sovet = Medical Council. 2019;(20):108–114. (In Russ.) doi: 10.21518/2079-701X-2019-20-108-114.Полякова С.Д., Батенева Н.Н., Попова Б.А. Комплексный подход к диагностике и лечению травматических отитов. Российская оториноларингология. 2009;(4):114–118. Режим доступа: https://elibrary.ru/item.asp?id=14617263.Polyakova S.D., Bateneva N.N., Popova E.A. Сomplex method for diagnostics and treatment of traumatic otitis. Rossiyskaya otorinolaringologiya = Russian Otorhinolaryngology. 2009;(4):114–118. (In Russ.) Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=14617263.Feidt H., Federspil P. Personal studies on the current spectrum of pathogenic bacteria in otitisexterna and chronic otitis media. Laryngorhinootologie. 1989;68(7):401–406. doi: 10.1055/s-2007-998363.Feidt H., Federspil P. Personal studies on the current spectrum of pathogenic bacteria in otitisexterna and chronic otitis media. Laryngorhinootologie. 1989;68(7):401–406. doi: 10.1055/s-2007-998363.Амонов Ш.Э., Саидов С.Х., Амонов А.Ш. Комплексная диагностика экссудативного среднего отита у детей. Российская оториноларингология. 2012;(5):14–16. Режим доступа: https://elibrary.ru/item.asp?id=18410624.Amonov Sh.E., Saidov S.H., Amonov A.Sh. Сomprehensive diagnosis of exudative otitis media in children. Rossiyskaya otorinolaringologiya = Russian Otorhinolaryngology. 2012;(5):14–16. (In Russ.) Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=18410624.Семенов Ф.В. Отомикроскопическое обследование больных с патологией среднего уха. Вестник оториноларингологии. 2001;(4):48–50. Режим доступа: https://elibrary.ru/item.asp?id=19730876.Semenov F.V. Otomicroscopic examination of patients with middle ear pathology. Vestnik otorinolaringologii = Bulletin of Otorhinolaryngology. 2001;(4):48–50. (In Russ.) Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=19730876.Крюков, А.И., Гуров А.В., Ельчанинов А.В., Мурзаханова З.В., Муратов Д.Л. Применение плазмы крови, обогащенной тромбоцитарными факторами роста, при экспериментальной перфорации барабанной перепонки. Вестник оториноларингологии. 2019;84(6):17–21. doi: 10.17116/otorino20198406117.Kryukov A.I., Gurov A.V., El‘chaninov A.V., Murzahanova Z.V., Muratov D.L. The use of blood plasma enriched with platelet growth factors during experimental perforation of the tympanic membrane. Vestnik otorinolaringologii = Bulletin of Otorhinolaryngology. 2019;84(6):17–21. (In Russ.). doi: 10.17116/otorino20198406117.Gans H. Nachbehandlung und Nachsorge bei Operationen am Ohr. HNO Praxis Heute. 1994;36(5):41–62. doi: 10.1007/978-3-642-78791-1_3.Gans H. Nachbehandlung und Nachsorge bei Operationen am Ohr. HNO Praxis Heute. 1994;36(5):41–62. doi: 10.1007/978-3-642-78791-1_3.Кротов Ю.А. Мирингопластика при обширных перфорациях барабанной перепонки. Вестник оториноларингологии. 2001;(5):57–59. Режим доступа: https://elibrary.ru/item.asp?id=29987753.Krotov Yu.A. Myringoplasty with extensive perforations of the tympanic membrane. Vestnik otorinolaringologii = Bulletin of Otorhinolaryngology. 2001;(5):57–59. (In Russ.) Available at: https://еlibrary.ru/item.asp?id=29987753.Onal K., Kazikdas K.C., Uğuz M.Z., Gursoy S.T., Gokce H. A multivariate analysis of otological, surgical and patient-related factors in determining success in myringoplasty. Clin Otolaryngol. 2005;30(2):115–120. doi: 10.1111/j.1365-2273.2004.00947.x.Onal K., Kazikdas K.C., Uğuz M.Z., Gursoy S.T., Gokce H. A multivariate analysis of otological, surgical and patient-related factors in determining success in myringoplasty. Clin Otolaryngol. 2005;30(2):115–120. doi: 10.1111/j.1365-2273.2004.00947.x.Xu Z. Analysis on characters of 220 cases of tympani membrane perforated. Fa Yi Xue Za Zhi. 2001;17(1):28–62. Available at: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12533889.Xu Z. Analysis on characters of 220 cases of tympani membrane perforated. Fa Yi Xue Za Zhi. 2001;17(1):28–62. Available at: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12533889.Gilbert T.W., Freund J.M., Badylak S.F. Quantification of DNA in biologic scaffold materials. J Surg Res. 2009;152(1):135–139. doi: 10.1016/j.jss.2008.02.013.Gilbert T.W., Freund J.M., Badylak S.F. Quantification of DNA in biologic scaffold materials. J Surg Res. 2009;152(1):135–139. doi: 10.1016/j.jss.2008.02.013.Гуров А.В., Михалева Л.М., Гордиенко М.В., Ермолаев А.Г., Мурзаханова З.В., Муратов Д.Л. Современные методы оценки морфофункционального состояния различных органов и тканей в оториноларингологии. Медицинский совет. 2019;(8):43–47. doi: 10.21518/2079-701X-2019-8-43-47.Gurov A.V., Mikhaleva L.M., Gordienko M.V., Ermolaev A.G., Murzakhanova Z.V., Muratov D.L. Modern methods of assessment of morphofunctional state of various organs and tissues in otolaryngology. Meditsinskiy sovet = Medical Council. 2019;(8):43–47. (In Russ.) doi: 10.21518/2079-701X-2019-8-43-47.Хелминская Н.М., Кравец В.И., Гончарова А.В., Краснов Н.М. Об эффективности и перспективах использования плазмы крови в комплексном замещении ограниченных костных дефектов челюстей. Медицинский альманах. 2015;(3):199–202. Режим доступа: https://elibrary.ru/item.asp?id=24361078.Khelminskaya N.M., Kravets V.I., Goncharova A.V., Krasnov N.M. Оn efficiency and prospects of use of blood plasma in complex substitution and limitation of bone defects of jaws. Meditsinskiy almanakh = Medical Almanac. 2015;(3):199– 202. (In Russ.) Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=24361078.Гончарова О.Г., Попова Л.П. Применение обогощенной тромбоцитами аутоплазмы при операциях на среднем ухе. Российская оториноларингология. 2009;(1):67–70. Режим доступа: https://elibrary.ru/item.asp?id=14565095.Goncharova O.G., Popova L.P. The use of platelet-rich autoplasma in middle ear surgery. Rossiyskaya otorinolaringologiya = Russian Otorhinolaryngology. 2009;(1):67–70. (In Russ.) Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=14565095.Hajiioannou J.K, Bizaki A., Fragiadakis G., Bourolias C., Spanakis I., Chlouverakis G. Optimal time for nasal packing removal after septoplasty. A comparative study. Rhinology. 2007;45(1):68–71. Available at: https://www.pubfacts.com/detail/17432074/Optimal-time-for-nasal-packingremoval-after-septoplasty-A-comparative-study.Hajiioannou J.K, Bizaki A., Fragiadakis G., Bourolias C., Spanakis I., Chlouverakis G. Optimal time for nasal packing removal after septoplasty. A comparative study. Rhinology. 2007;45(1):68–71. Available at: https://www.pubfacts.com/detail/17432074/Optimal-time-for-nasal-packingremoval-after-septoplasty-A-comparative-study.Eppley B. Pietrzak W., Blanton M. Platelet-rich plasma: a review of biology and applications in plastic surgery. Plast ReconstrSurg. 2006;118(6):147е–159е. Available at: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17051095/.Eppley B. Pietrzak W., Blanton M. Platelet-rich plasma: a review of biology and applications in plastic surgery. Plast ReconstrSurg. 2006;118(6):147е–159е. Available at: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17051095/.Yaşar M., Kaya A., Karaman H., Kavugudurmaz M., Polat H., Sağıt M., Özcan İ. Potential Curative Role of Hypericum Perforatum in an Experimental Rat Model of TympanicMembrane Perforation. J Int Adv Otol. 2016;12(3):252– 256. doi: 10.5152/iao.2016.1612.Yaşar M., Kaya A., Karaman H., Kavugudurmaz M., Polat H., Sağıt M., Özcan İ. Potential Curative Role of Hypericum Perforatum in an Experimental Rat Model of TympanicMembrane Perforation. J Int Adv Otol. 2016;12(3):252– 256. doi: 10.5152/iao.2016.1612.Weyrich A.S., Schwertz H., Kraiss L.W., Zimmerman G.A. Protein synthesis by platelets: historical and new perspectives. J Thromb Haemost. 2009;7(2):241–246. doi: 10.1111/j.1538-7836.2008.03211.x.Weyrich A.S., Schwertz H., Kraiss L.W., Zimmerman G.A. Protein synthesis by platelets: historical and new perspectives. J Thromb Haemost. 2009;7(2):241–246. doi: 10.1111/j.1538-7836.2008.03211.x.Anitua E., Andia I., Sanchez M., Azofra J., del Mar Zalduendo M., de la Fuente M. et al. Autologous preparations rich in growth factors promote proliferation and induce VEGF and HGF production by human tendon cells in culture. J Orthop Res. 2009;23(2):281–286. doi: 10.1016/j.orthres.2004.08.015.Anitua E., Andia I., Sanchez M., Azofra J., del Mar Zalduendo M., de la Fuente M. et al. Autologous preparations rich in growth factors promote proliferation and induce VEGF and HGF production by human tendon cells in culture. J Orthop Res. 2009;23(2):281–286. doi: 10.1016/j.orthres.2004.08.015.Karataylı Özgürsoy S., Tunçkaşık M., Tunçkaşık F., Akıncıoğlu E., Doğan H., Kocatürk S. Platelet-Rich Plasma Application for Acute Tympanic Membrane Perforations. J Int Adv Otol. 2017;13(2):195–199. doi: 10.5152/iao.2016.2533.Karataylı Özgürsoy S., Tunçkaşık M., Tunçkaşık F., Akıncıoğlu E., Doğan H., Kocatürk S. Platelet-Rich Plasma Application for Acute Tympanic Membrane Perforations. J Int Adv Otol. 2017;13(2):195–199. doi: 10.5152/iao.2016.2533.Ayala-Montes de Oca A., Alla S.N., López-Valdés J.C. Effectiveness of topical phenytoin therapy versus platelet-rich plasma for tympanic perforations closure: Comparative study. Rev Med Hosp Gen Méx. 2016;79(4):183– 188. doi: 10.1016/J.HGMX.2016.05.006.Ayala-Montes de Oca A., Alla S.N., López-Valdés J.C. Effectiveness of topical phenytoin therapy versus platelet-rich plasma for tympanic perforations closure: Comparative study. Rev Med Hosp Gen Méx. 2016;79(4):183– 188. doi: 10.1016/J.HGMX.2016.05.006.Costa-Almeida R., Soares R., Granja P.L. Fibroblasts as maestros orchestrating tissue regeneration. J Tissue Eng Regen Med. 2018;12(1):240–251. doi: 10.1002/term.2405.Costa-Almeida R., Soares R., Granja P.L. Fibroblasts as maestros orchestrating tissue regeneration. J Tissue Eng Regen Med. 2018;12(1):240–251. doi: 10.1002/term.2405.Hinck A.P., Mueller T.D., Springer T.A. Structural Biology and Evolution of the TGF-β Family. Cold Spring Harb Perspect Biol. 2016;8(12):a022103. doi: 10.1101/cshperspect.a022103.Hinck A.P., Mueller T.D., Springer T.A. Structural Biology and Evolution of the TGF-β Family. Cold Spring Harb Perspect Biol. 2016;8(12):a022103. doi: 10.1101/cshperspect.a022103.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.