medsovetМедицинский СоветMeditsinskiy sovet = Medical Council2079-701X2658-5790REMEDIUM GROUP Ltd.10.21518/ms2025-261medsovet-9369Research ArticleГИНЕКОЛОГИЯGYNECOLOGYПодходы к поиску иммунологических маркеров эндометриоза и степени его распространенностиApproaches to the search for immunological markers of endometriosis and the degree of its prevalencehttps://orcid.org/0000-0001-5023-3476КречетоваЛ. В.KrechetovaL. V.

Кречетова Любовь Валентиновна, д.м.н., заведующая лабораторией клинической иммунологии

117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4

Lyubov V. Krechetova, Dr. Sci. (Med.), Head of the Laboratory of Clinical Immunology

4, Academician Oparin St., Moscow, 117997

l_krechetova@oparina4.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3367-6774КоротковаТ. Д.KorotkovaT. D.

Короткова Татьяна Денисовна, врач – акушер-гинеколог, аспирант отделения оперативной гинекологии

117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4

Tatiana D. Korotkova, Obstetrician-Gynecologist, Рostgraduate Student of the Gynecological Department

4, Academician Oparin St., Moscow, 117997

t-korotkova@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9878-3637ИнвияеваЕ. B.InviyaevaE. V.

Инвияева Евгения Владимировна, к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории клинической иммунологии

117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4

Eugeniya V. Inviyaeva, Cand. Sci. (Biol.), Leading Researcher of the Laboratory of Clinical Immunology

4, Academician Oparin St., Moscow, 117997

e_inviyaeva@oparina4.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3253-4512АдамянЛ. В.AdamyanL. V.

Адамян Лейла Владимировна, академик РАН, д.м.н., профессор, заведующая гинекологическим отделением, заместитель директора по научной работе

117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4

Leila V. Adamyan, Acad. RAS, Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of the Gynecological Department, Deputy Scientific Director

4, Academician Oparin St., Moscow, 117997

Adamyanleila@gmail.comНациональный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. КулаковаРоссияKulakov National Medical Research Center of Obstetrics, Gynecology and PerinatologyRussian Federation2025100920251913227235Copyright © Кречетова Л.В., Короткова Т.Д., Инвияева Е.B., Адамян Л.В., 20252025Кречетова Л.В., Короткова Т.Д., Инвияева Е.B., Адамян Л.В.Krechetova L.V., Korotkova T.D., Inviyaeva E.V., Adamyan L.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.med-sovet.pro/jour/article/view/9369Введение

Введение. Врожденной иммунной системе принадлежит ведущая роль в инициировании и прогрессировании очагов наружного генитального эндометриоза (НГЭ).

Цель

Цель. Провести анализ содержания субпопуляций иммунокомпетентных клеток и уровня цитокинов в периферической кро-ви (ПК) и перитонеальной жидкости (ПЖ) для выявления наиболее информативных показателей в качестве неинвазивных маркеров НГЭ и степени его распространенности.

Материалы и методы

Материалы и методы. Фенотипирование лимфоцитов методом проточной цитометрии и оценку содержания цитокинов муль-типлексным методом (27-плексная панель) проводили у женщин с НГЭ I–II cтепени (n = 20) и III–IV cтепени распространения (n = 28) в ПК до хирургической операции и в ПЖ интраоперационно. Группа сравнения – 19 женщин с отсутствием НГЭ. Результаты. В ПК женщин с НГЭ, независимо от степени распространенности процесса, обнаружено

увеличение содержания лейкоцитов, нейтрофилов, НФ-/ЛФ-индекса и снижение содержания лимфоцитов, изменение  в соотношении классиче-ских и промежуточных моноцитов, низкое содержание T-рег, обнаружена прямая связь между содержанием в ПК и в ПЖ субпопуляций Т-регуляторных клеток (CD56+TCRγδ+, TCRγδ+, Т-рег с фенотипом CD4+CD25

+CD127low/-)

+CD127low/-). Для диагностики НГЭ I–II степени распространенности были получены лучшие параметры значимости для содержания в ПЖ МСР-1, MIP-1β, а для НГЭ III–IV степени распространенности – ИЛ-6, ИЛ-8. В ПК пациенток подгруппы ЭМ-1 обнаружены обратные связи между регуляторными NK-клетками с цитокинами, что может отражать иммунный дисбаланс на системном уровне. В ПК пациенток подгруппы ЭМ-2 выявлены прямые связи средней силы CD200+-клеток с широким спектром цитокинов, что отражает хронизацию воспалительного процесса.

Выводы

Выводы. Перспективы дальнейших исследований НГЭ разных форм распространения связаны именно с формированием панелей неинвазивных маркеров.

Introduction

Introduction. The innate immune system plays a leading role in the initiation and progression of external genital endometriosis (EGE) lesions.

Aim

Aim. Тo analyze the content of subpopulations of immunocompetent cells and the level of cytokines in peripheral blood (PB) and peritoneal fluid (PF) to identify the most informative indicators as non-invasive markers of EGE and the degree of its prevalence. Materials and methods. Phenotyping of lymphocytes by flow cytometry and assessment of cytokine content by multiplex method (27-plex panel) were performed in women with EGE of I–II degree (n = 20) and III–IV degree of prevalence (n = 28) in the PB before surgery and in the PF intraoperatively. The comparison group included 19 women without EGE.

Results

Results. In the PB of women with EGE, regardless of the degree of prevalence of the process, an increase in the content of leukocytes, neutrophils, NF/LF index and a decrease in the content of lymphocytes, a change in the ratio of classical and intermediate monocytes, a low content of T-reg were found, a direct relationship was found between the content of T-regulatory cell subpopulations in the PB and in the PF. For the diagnosis of EGE of I-II degree of prevalence, the best parameters of significance were obtained for the content of MCP-1, MIP-1β in the PF, and for EGE of III-IV degree of prevalence – IL-6, IL-8. In the EGE I-II subgroup of patients, feedback was found between regulatory NK cells and cytokines, which may reflect an immune imbalance at the systemic level. In the EGE III-IV subgroup of patients, direct medium-strength connections were found between CD200+ cells and a wide range of cytokines, which reflects the chronicity of the inflammatory process.

Conclusions

Conclusions. Prospects for further research into EGE of various degree of prevalence are associated precisely with the formation of panels of non-invasive markers.

наружный генитальный эндометриозстерильное воспалениесубпопуляции лимфоцитовцитокиныперитонеальная жидкостьпериферическая кровькорреляционные связиexternal genital endometriosissterile inflammationlymphocyte subpopulationscytokinesperitoneal fluidperipheral bloodcorrelationsРабота выполнена в рамках государственного задания 121032500124-9.The work was carried out within the framework of the state task 121032500124-9.ReferencesАдамян ЛВ, Кулаков ВИ, Андреева ЕН. Эндометриозы. М.: Медицина; 2006. 410 с.Адамян ЛВ, Кулаков ВИ, Андреева ЕН. Эндометриозы. М.: Медицина; 2006. 410 с.Horne AW, Saunders PTK. SnapShot: Endometriosis. Cell. 2019;179(7):1677–1677.e1. https://doi.org/10.1016/j.cell.2019.11.033.Horne AW, Saunders PTK. SnapShot: Endometriosis. Cell. 2019;179(7):1677–1677.e1. https://doi.org/10.1016/j.cell.2019.11.033.Ahn SH, Singh V, Tayade C. Biomarkers in endometriosis: Challenges and opportunities. Fertil Steril. 2017;107(3):523–532. https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2017.01.009.Ahn SH, Singh V, Tayade C. Biomarkers in endometriosis: Challenges and opportunities. Fertil Steril. 2017;107(3):523–532. https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2017.01.009.Agarwal SK, Chapron C, Giudice LC, Laufer MR, Leyland N, Missmer SA et al. Clinical diagnosis of endometriosis: a call to action. Am J Obstet Gynecol. 2019;220(4):354.e1–354.e12. https://doi.org/10.1016/j.ajog.2018.12.039.Agarwal SK, Chapron C, Giudice LC, Laufer MR, Leyland N, Missmer SA et al. Clinical diagnosis of endometriosis: a call to action. Am J Obstet Gynecol. 2019;220(4):354.e1–354.e12. https://doi.org/10.1016/j.ajog.2018.12.039.Coutinho AJr, Bittencourt LK, Pires CE, Junqueira F, Lima CM, Coutinho E et al. MR imaging in deep pelvic endometriosis: a pictorial essay. Radiographics. 2011;31(2):549–567. https://doi.org/10.1148/rg.312105144.Coutinho AJr, Bittencourt LK, Pires CE, Junqueira F, Lima CM, Coutinho E et al. MR imaging in deep pelvic endometriosis: a pictorial essay. Radiographics. 2011;31(2):549–567. https://doi.org/10.1148/rg.312105144.Nisenblat V, Prentice L, Bossuyt PM, Farquhar C, Hull ML, Johnson N. Combination of the non-invasive tests for the diagnosis of endometriosis. Cochrane Database Syst Rev. 2016;7(7):CD012281. https://doi.org/10.1002/14651858.CD012281.Nisenblat V, Prentice L, Bossuyt PM, Farquhar C, Hull ML, Johnson N. Combination of the non-invasive tests for the diagnosis of endometriosis. Cochrane Database Syst Rev. 2016;7(7):CD012281. https://doi.org/10.1002/14651858.CD012281.Wang Y, Nicholes K, Shih IM. The origin and pathogenesis of endometriosis. Annu Rev Pathol. 2020;15:71–95. https://doi.org/10.1146/annurev-pathmechdis-012419-032654.Wang Y, Nicholes K, Shih IM. The origin and pathogenesis of endometriosis. Annu Rev Pathol. 2020;15:71–95. https://doi.org/10.1146/annurev-pathmechdis-012419-032654.As-Sanie S, Black R, Giudice LC, Valbrun TG, Gupta J, Jones B et al. Assessing research gaps and unmet needs in endometriosis Am J Obstet Gynecol. 2019;221(2):86–94. https://doi.org/10.1016/j.ajog.2019.02.033.As-Sanie S, Black R, Giudice LC, Valbrun TG, Gupta J, Jones B et al. Assessing research gaps and unmet needs in endometriosis Am J Obstet Gynecol. 2019;221(2):86–94. https://doi.org/10.1016/j.ajog.2019.02.033.Bazot M, Bharwani N, Huchon C, Kinkel K, Cunha T, Guerra A et al. European society of urogenital radiology (ESUR) guidelines: MR imaging of pelvic endometriosis. Eur Radiol. 2017;27(7):2765–2775. https://doi.org/10.1007/s00330-016-4673-z.Bazot M, Bharwani N, Huchon C, Kinkel K, Cunha T, Guerra A et al. European society of urogenital radiology (ESUR) guidelines: MR imaging of pelvic endometriosis. Eur Radiol. 2017;27(7):2765–2775. https://doi.org/10.1007/s00330- 016-4673-z.Chapron C, Querleu D, Bruhat M-A, Madelenat P, Fernandez H, Pierre I, Dubuisson J. Surgical complications of diagnostic and operative gynaecological laparoscopy: a series of 29,966 cases. Hum Reprod.1998;13(4):867–872. https://doi.org/10.1093/humrep/13.4.867.Chapron C, Querleu D, Bruhat M-A, Madelenat P, Fernandez H, Pierre I, Dubuisson J. Surgical complications of diagnostic and operative gynaecological laparoscopy: a series of 29,966 cases. Hum Reprod.1998;13(4):867–872. https://doi.org/10.1093/humrep/13.4.867.Jansen FW, Kapiteyn K, Trimbos-Kemper T, Hermans J, Trimbos JB. Complications of laparoscopy: a prospective multicentre observational study. Br J Obstet Gynaecol. 1997;104(5):595–600. https://doi.org/10.1111/j.1471-0528.1997.tb11539.x.Jansen FW, Kapiteyn K, Trimbos-Kemper T, Hermans J, Trimbos JB. Complications of laparoscopy: a prospective multicentre observational study. Br J Obstet Gynaecol. 1997;104(5):595–600. https://doi.org/10.1111/j.1471-0528.1997.tb11539.x.Wickiewicz D, Chrobak A, Gmyrek GB, Halbersztadt A, Gabryś MS, Goluda M, Chełmońska-Soyta A. Diagnostic accuracy of interleukin-6 levels in peritoneal fluid for detection of endometriosis. Arch Gynecol Obstet. 2013;288(4):805–814. https://doi.org/10.1111/1471-0528.14711.Wickiewicz D, Chrobak A, Gmyrek GB, Halbersztadt A, Gabryś MS, Goluda M, Chełmońska-Soyta A. Diagnostic accuracy of interleukin-6 levels in peritoneal fluid for detection of endometriosis. Arch Gynecol Obstet. 2013;288(4):805–814. https://doi.org/10.1111/1471-0528.14711.Hadfield R, Mardon H, Barlow D, Kennedy S. Delay in the diagnosis of endometriosis: a survey of women from the USA and the UK. Hum Reprod. 1996;11(4): 878–880. https://doi.org/10.1093/oxfordjournals.humrep.a019270.Hadfield R, Mardon H, Barlow D, Kennedy S. Delay in the diagnosis of endometriosis: a survey of women from the USA and the UK. Hum Reprod. 1996;11(4): 878–880. https://doi.org/10.1093/oxfordjournals.humrep.a019270.Nnoaham KE, Hummelshoj L, Webster P, d’Hooghe T, de Cicco Nardone F, de Cicco Nardone C et al. Impact of endometriosis on quality of life and work productivity: a multicenter study across ten countries. Fertil Steril. 2011;96(2):366–373. https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2011.05.090.Nnoaham KE, Hummelshoj L, Webster P, d’Hooghe T, de Cicco Nardone F, de Cicco Nardone C et al. Impact of endometriosis on quality of life and work productivity: a multicenter study across ten countries. Fertil Steril. 2011;96(2):366–373. https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2011.05.090.Hudelist G, Fritzer N, Thomas A, Niehues C, Oppelt P, Haas D et al. Diagnostic delay for endometriosis in Austria and Germany: causes and possible consequences. Hum Reprod. 2012;27(12):3412–3416. https://doi.org/10.1093/humrep/des316.Hudelist G, Fritzer N, Thomas A, Niehues C, Oppelt P, Haas D et al. Diagnostic delay for endometriosis in Austria and Germany: causes and possible consequences. Hum Reprod. 2012;27(12):3412–3416. https://doi.org/10.1093/humrep/des316.Zindel J, Kubes P. DAMPs, PAMPs, and LAMPs in Immunity and Sterile Inflammation. Annu Rev Pathol. 2020;15:493–518. https://doi.org/10.1146/annurev-pathmechdis-012419-032847.Zindel J, Kubes P. DAMPs, PAMPs, and LAMPs in Immunity and Sterile Inflammation. Annu Rev Pathol. 2020;15:493–518. https:// doi.org/10.1146/annurev-pathmechdis-012419-032847.Lukács L, Kovács AR, Pál L, Szűcs S, Kövér Á, Lampé R. Phagocyte function of peripheral neutrophil granulocytes and monocytes in endometriosis before and after surgery. J Gynecol Obstet Hum Reprod. 2021;50(4):101796. https://doi.org/10.1016/j.jogoh.2020.101796.Lukács L, Kovács AR, Pál L, Szűcs S, Kövér Á, Lampé R. Phagocyte function of peripheral neutrophil granulocytes and monocytes in endometriosis before and after surgery. J Gynecol Obstet Hum Reprod. 2021;50(4):101796. https://doi.org/10.1016/j.jogoh.2020.101796.Короткова ТД, Кречетова ЛВ, Инвияева ЕВ, Вторушина ВВ, Ванько ЛВ, Адамян ЛВ. Фенотипическая характеристика субпопуляций клеток врожденного иммунитета в периферической крови женщин с эндометриозом до и после хирургического лечения. Акушерство и гинекология. 2021;(10):93–102. https://doi.org/10.18565/aig.2021.10.93-102.Korotkova TD, Krechetova LV, Inviyaeva EV, Vtorushina VV, Vanko LV, Adamyan LV. Phenotypic characterization of peripheral blood innate immune cell subpopulations in women with endometriosis before and after surgery. Akusherstvo i Ginekologiya (Russian Federation). 2021;(10):93–102. (In Russ.) https://doi.org/10.18565/aig.2021.10.93-102.Westman J, Grinstein S, Marques PE. Phagocytosis of Necrotic Debris at Sites of Injury and Inflammation. Front Immunol. 2020;10:3030. https://doi.org/10.3389/fimmu.2019.03030.Westman J, Grinstein S, Marques PE. Phagocytosis of Necrotic Debris at Sites of Injury and Inflammation. Front Immunol. 2020;10:3030. https://doi.org/10.3389/fimmu.2019.03030.Овакимян АС, Кречетова ЛВ, Вторушина ВВ, Ванько ЛВ, Козаченко ИФ, Яроцкая ЕЛ, Адамян ЛВ. Содержание IL-1β, IL-8 и субстанции Р в плазме крови и перитонеальной жидкости пациенток с различными формами наружного генитального эндометриоза и хронической тазовой болью. Акушерство и гинекология. 2015;(3):79–86. Режим доступа: https://aig-journal.ru/archive/9512.Ovakimyan AS, Krechetova LV, Vtorushina VV, Vanko LV, Kozachenko IF, Yarotskaya EL, Adamyan LV. The content of IL-1b, IL-8 and substance P in the blood plasma and peritoneal fluid of patients with various forms of external genital endometriosis and chronic pelvic pain. Akusherstvo i Ginekologiya (Russian Federation). 2015;(3):79–86. (In Russ.) Available at: https://aig-journal.ru/archive/9512.Павлович СВ, Кречетова ЛВ, Вторушина ВВ, Ванько ЛВ, Юшина МН, Савилова АМ и др. Особенности профиля секретируемых белков клетками из эндометриоидных очагов и эуктопического эндометрия женщин с наружным генитальным эндометриозом в культуре in vitro. Акушерство и гинекология. 2019;(8):90–99. https://doi.org/10.18565/aig.2019.8.90-99.Pavlovich SV, Krechetova LV, Vtorushina VV, Vanko LV, Melkumyan AG, Yushina MN et al. Features of the profile of proteins secreted by cells from the endometrioid foci and eutopic endometrium in women with external genital endometriosis in vitro culture. Akusherstvo i Ginekologiya (Russian Federation). 2019;(8):90–99. (In Russ.) https://doi.org/10.18565/aig.2019.8.90-99.Калашникова АА, Ворошилова ТМ, Чинонова ЛВ, Давыдова НИ, Калинина НМ. Субпопуляции могоцитов у здоровых лиц и у пациентов с сепсисом. Медицинская иммунология. 2018;20(6):815–824. https://doi.org/10.15789/1563-0625-2018-6-815-824.Kalashnikova AA, Voroshilova TM, Chinenova LV, Davydova NI, Kalinina NM. Monocyte subsets in healthy adults and sepsis patients. Medical Immunology (Russia). 2018;20(6):815–824. (In Russ.) https://doi.org/10.15789/1563-0625-2018-6-815-824.Ginhoux F, Jung S. Monocytes and macrophages: developmental pathways and tissue homeostasis. Nat Rev Immunol. 2014;14(6):392–404. https://doi.org/10.1038/nri3671.Ginhoux F, Jung S. Monocytes and macrophages: developmental pathways and tissue homeostasis. Nat Rev Immunol. 2014;14(6):392–404. https://doi.org/10.1038/nri3671.Сельков СА, Ярмолинская МИ. Эндометриоз как патология регуляторных механизмов. Журнал акушерства и женских болезней. 2017;66(2):9–13. https://doi.org/10.17816/JOWD6629-13.Selkov SA, Yarmolinskaya MI. Endometriosis as a pathology of regulatory mechanisms. Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2017;66(2):9–13. (In Russ.) https://doi.org/10.17816/JOWD6629-13.Prat M, Le Naour A, Coulson K, Lemée F, Leray H, Jacquemin G et al. Circulating CD14high CD16low intermediate blood monocytes as a biomarker of ascites immune status and ovarian cancer progression. J Immunother Cancer. 2020;8(1):e000472. https://doi.org/10.1136/jitc-2019-000472.Prat M, Le Naour A, Coulson K, Lemée F, Leray H, Jacquemin G et al. Circulating CD14high CD16low intermediate blood monocytes as a biomarker of ascites immune status and ovarian cancer progression. J Immunother Cancer. 2020;8(1):e000472. https://doi.org/10.1136/jitc-2019-000472.Кречетова ЛВ, Инвияева ЕВ, Короткова ТД, Ванько ЛВ, Адамян ЛВ. Роль системного и локального иммунитета в патогенезе эндометриоза разной степени распространенности процесса: современный взгляд. Проблемы репродукции. 2024;30(5):6–4 https://doi.org/10.17116/repro2024300516.Krechetova LV, Inviyaeva EV, Korotkova TD, Vanko LV, Adamyan LV. The role of systemic and local immunity in the pathogenesis of endometriosis of varying degrees of prevalence of the process: a modern view. Russian Journal of Human Reproduction. 2024;30(5):6–14. (In Russ.) https://doi.org/10.17116/repro2024300516.Borrelli GM, Kaufmann AM, Abrão MS, Mechsner S. Addition of MCP-1 and MIP-3β to the IL-8 appraisal in peritoneal fluid enhances the probability of identifying women with endometriosis. J Reprod Immunol. 2015;109:66–73. https://doi.org/10.1016/j.jri.2015.01.003.Borrelli GM, Kaufmann AM, Abrão MS, Mechsner S. Addition of MCP-1 and MIP-3β to the IL-8 appraisal in peritoneal fluid enhances the probability of identifying women with endometriosis. J Reprod Immunol. 2015;109:66–73. https://doi.org/10.1016/j.jri.2015.01.003.Toshio H. IL-6 in inflammation, autoimmunity and cancer. Int Immunol. 2021;33(3):127–148. https://doi.org/10.1093/intimm/dxaa078.Toshio H. IL-6 in inflammation, autoimmunity and cancer. Int Immunol. 2021;33(3):127–148. https://doi.org/10.1093/intimm/dxaa078.Burns KA, Thomas SY, Hamilton KJ, Young SL, Cook DN, Korach KS. Early Endometriosis in Females Is Directed by Immune-Mediated Estrogen Receptor α and IL-6 Cross-Talk. Endocrinology. 2018;159(1):103–118. https://doi.org/10.1210/en.2017-00562.Burns KA, Thomas SY, Hamilton KJ, Young SL, Cook DN, Korach KS. Early Endometriosis in Females Is Directed by Immune-Mediated Estrogen Receptor α and IL-6 Cross-Talk. Endocrinology. 2018;159(1):103–118. https://doi.org/10.1210/en.2017-00562.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.